实验流程：
HPLC系统的启动→准备流动相→平衡色谱柱及色谱系统→准备样品→编辑仪器方法，开始实验→清洗色谱柱及色谱系统→关闭仪器
虫草素测定：
样品处理：发酵液10000rpm离心10min，取上清液稀释10-20倍进样。
色谱条件：
色谱柱：Ultimate？AQ-C18 (4.6×250 mm 5μm)
流动相：甲醇:10mmol/LKH2PO4=15:85
流速及运行时间：1.0 mL/min，20min
二极管阵列检测器：波长254nm
柱温：30℃
DOX测定：
样品制备：取动物的心、肝组织，使用生理盐水洗净组织上的血液，再使用匀浆机（FastPrep-24TM5G, Shanghai boyi biotechnology co. LTD）进行匀浆。匀浆后的组织加入5mL三氯甲烷:甲醇=4:1的混合溶液，粉碎超声10min，8000r/min离心10分钟，取下层三氯甲烷溶液60℃旋蒸蒸干后，加入3mL的甲醇溶液，8000r/min离心10分钟，取上清液进样。
色谱条件：
色谱柱：Ultimate？AQ-C18 (4.6×250 mm 5μm)
流动相：甲醇:乙腈:0.02mol/L pH>4磷酸二氢铵-冰醋酸=52:5:43
流速及运行时间：1.0mL/min，20min
荧光检测器：波长：EX=246nm，EM=555nm
柱温：30℃
ATP检测：
样品制备：收集细胞，用高氯酸溶液（0.1 mol/L）冰浴下充分匀浆，取匀浆液于4℃、14000 rpm离心10 min，取上清液重复离心一次，并用0.22 μm滤膜过滤后用于检测。
色谱条件：
色谱柱：Ultimate？AQ-C18 (4.6×250 mm 5μm)
流动相：30 mM 磷酸盐缓冲液(pH 6.0):甲醇=95:5；
流速：0.5 mL/min，10 min；
检测波长：254 nm；
检测温度：25℃；
进样量：20 μL；
全反式视黄酸检测：
样品制备：取小鼠腰5段脊髓于1.5ml离心管中，加入预冷生理盐水30μl，研磨杵研磨，冰上进行。匀浆后的组织加入60μl乙腈（含1%冰醋酸溶液）混合溶液，振荡30s，4℃条件下10000g离心10分钟。吸取上清于棕色小瓶中待测。
色谱条件：
色谱柱：Ultimate？AQ-C18 (4.6×250 mm 5μm)
流动相：乙腈:0.1%冰醋酸溶液=86:14
流速及运行时间：1ml/min，30min
检测波长：350nm
柱温：25℃
组胺测定：
样品制备：
衍生化条件：
a.100 μl样品溶液加入棕色EP管；
b.加入50μl 2M氢氧化钠溶液（4g氢氧化钠溶于50 ml纯水中）；
c.加入200μl饱和碳酸氢钠溶液（10g碳酸氢钠溶于100 ml纯水中，超声溶解）；
d.加入500μl丹磺酰氯丙酮溶液（0.5g丹磺酰氯溶于50 ml丙酮中，密封保存），涡旋混匀，40℃，避光反应60min；
e.加入150μl氨水乙腈溶液（10ml氨水与10 ml乙腈混合），放置室温下30min后，4℃，8000rpm离心10 min，取上清测样。
色谱条件：
色谱柱：SunFire？ C18 5μm 4.6×250mm
流动相：
A：0.1M醋酸铵(pH7.9)；B：乙腈
洗脱程序：
Time（min） | A(%) | B(%) |
0 | 65 | 35 |
15 | 30 | 70 |
25 | 5 | 95 |
30 | 5 | 95 |
31 | 65 | 35 |
流速及运行时间：1ml/min，40min
检测波长：254nm
柱温：25℃